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丁酸钠对肉仔鸡促生长机理研究
发表时间:2014/12/5 浏览次数:765 文章来源:〖返回列表
 

摘要:本试验旨在弄清粉剂丁酸钠和包膜丁酸钠促进肉仔鸡养分消化率、吸收率,改善肠道健康的机理。

关键词:肉仔鸡、丁酸钠、肠道健康

1.1 试验材料
    粉剂丁酸钠(powder sodium butyrate)制剂,含丁酸钠 98%,由杭州康德权饲料有限公司提供。
    包膜丁酸钠(coated sodium butyrate)制剂,含丁酸钠 30%,由杭州康德权饲料有限公司提供。
    杆菌肽锌(10%),由天恩集团德州康达畜牧有限公司提供。
    硫酸粘杆菌素(10%),由天恩集团德州康达畜牧有限公司提供。

1.2 试验动物与试验设计
    选用 1 日龄爱拔益加(AA)商品肉仔鸡 480 只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40只。对照组(CTR):饲喂基础日粮(不含抗生素和丁酸钠);ZC组:基础日粮+杆菌肽锌40mg/kg+硫酸粘杆菌素8mg/kg ; PSB组:基础日粮+200mg/kg 粉剂丁酸钠制剂(powder sodium butyrate,含丁酸钠98%);CSB 组:基础日粮+200mg/kg 包膜丁酸钠制剂(coated sodium butyrate,含丁酸钠30%)。试验期分1-21日龄和22-42日龄2个阶段进行。
1.3 试验日粮及饲养管理
    试验采用玉米-豆粕型日粮,营养水平参照NRC(1994)肉仔鸡标准配制。试验鸡网上饲养,自由采食、饮水;光照24h/d;温度:第1周保持33 ºC,随后每周降低2 ºC,直到26 ºC为止;平均饲养密度:10只/m2;免疫:7日龄新城疫、鸡传染性支气管炎二联苗以及禽流感疫苗点眼、滴鼻、注射,14日龄法氏囊饮水。

1.4 指标测定及方法
1.4.1 生产性能

    饲养期间每天记录鸡的进食量。21日龄和42日龄时测定每个重复肉仔鸡的体重,计算日均采食量、平均日增重和料重比。
1.4.2 屠宰和试验材料的采取
    在饲养试验的14 d和35 d,每个处理分别抽取12只鸡(每个重复4只)进行屠宰试验。屠宰过程中,打开腹腔,迅速取出并分离肠段。将盲肠结扎,用锡纸包好后放入冰盒内保存,用于测定盲肠微生物。测定腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和回肠各消化道肠段的pH值;取适量十二指肠、空肠和回肠食糜,液氮保存,用于消化酶和VFA的测定;取十二指肠、空肠、回肠中段约3 cm长的肠段,用pH = 7.4的磷酸盐缓冲盐水冲洗后迅速放入装有10%福尔马林的固定液中样本瓶中固定。
1.4.3 pH值的测定
    胃:将腺胃和肌胃剪开一个口,将pH计电极的玻璃珠放到食糜表面,读取pH值。
    十二指肠:在十二指肠两端以及1/4处分别测定pH值,共4个部位。
    空肠:在空肠两端、中间以及1/4处分别测定pH值,共4个部位。
    回肠:在回肠两端、中间以及1/4处分别测定pH值,共4个部位。
1.4.4 挥发性脂肪酸的测定
    VFA的前处理:取2-3g(精确计量)样本用3mL0.1 mol/L硫酸悬浮,4 ºC、12000×g离心15 min。1mL上清液中加入0.1mL己酸。样本在液氮中过夜。气相色谱法测定乙酸、丙酸和丁酸。色谱条件:柱温140 ºC,氮气流速40mL/min,空气流速0.5mL/min,进样量1μL。融化纯化后的样品,用气相色谱(GC)测定乙酸、丙酸和丁酸。
1.4.5 消化酶活性测定
    1) 淀粉酶的测定:采用试剂盒法,试剂盒由南京建成科技有限公司提供。原理:淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出淀粉酶的活力。

    2) 脂肪酶的测定:采用试剂盒法,试剂盒由南京建成科技有限公司提供。原理:甘油三酯和水制成的乳胶,因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。胶束中的甘油三酯在脂肪酶作用下发生水解,使胶束分裂,散射光或浊度因而减低。减低的速率与脂肪酶活力有关。
    3) 胰蛋白酶的测定:采用试剂盒法,试剂盒由南京建成科技有限公司提供。原理:胰蛋白酶能催化水解底物精氨酸乙酯的酯链,使其在253nm处吸光值升高,根据吸光度的变化可以计算出酶的活力。
1.4.6 组织切片:
    用LEICA RM2135切片机与BMJ-3型包埋机做成石蜡切片,用日本PM.20显微照像设备采集图像,然后用Motic Images 2000 1.3软件测量绒毛长度与隐窝深度,并计算各个处理绒毛长度与隐窝深度的比值。每个肠段量取约15根绒毛高度和15个隐窝深度。
2.4.7 盲肠微生物的测定
    测定:乳酸菌、沙门氏菌、大肠杆菌、芽孢杆菌
    测定过程分为样品处理、滴种、培养和微生物记数与鉴定。样品处理:准确称取盲肠内容物重量,并以1:10的稀释比例加入灭菌的生理盐水,用小型震荡器(250 次/min)震荡混合,吸取0.5 mL注入第二个灭菌试管,按1:10的比例加入稀释液,依次类推,作倍比稀释。滴种和培
养:用移液器吸取100 ul经稀释后的样本,滴入各选择性培养基,每个样本重复4个平皿,每个平皿选择4个稀释度,迅速倒入45 ºC的培养基后立刻摇匀。四种菌均在37 ºC恒温箱中培养48h。微生物记数与鉴定:采用常规微生物平板菌落计数法,选择长有30-300个菌落的平板较为合适,测定肉仔鸡盲肠每克内容物所含的大肠杆菌、乳酸杆菌等的菌落数。
2.5 数据分析
    数据采用SAS 8.0软件进行统计学处理。方差分析使用One-way ANOVA,多重比较采用Duncan氏法,P<0.05为差异显著。

 

······

 

结论:

    丁酸钠能够提高肉仔鸡的饲料转化率,改善生产性能,降低肠道pH,且能够提高肠道VFA的
含量、提高消化酶活性,增加盲肠有益菌群繁殖,且包膜丁酸钠制剂效果优于粉剂丁酸钠制剂。

 
 
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